Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов, типы тестов и расшифровка, цены

Определение степени фрагментации ДНК сперматозоидов (Tunel, SCSA)

Фрагментация ДНК сперматозоидов, как один из факторов нарушения мужской фертильности, открыт не так давно — около 10 лет назад, и патофизиологические механизмы процесса фрагментации ДНК продолжают изучаться. Однако установлено, что показатель фрагментации ДНК сперматозоидов имеет определенное диагностическое и прогностическое значение в супружеских парах с нарушением репродукции.

Фрагментация ДНК сперматозоидов – это наличие одно- и двухцепочечных разрывов молекулы ДНК, нарушение целостности генетического материала сперматозоида. Именно в этой молекуле закодирована и хранится вся генетическая информация, которая при зачатии передается ребенку. И чем больше в молекуле ДНК таких разрывов, тем меньше вероятность оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом.

Причинами фрагментации ДНК могут явиться отклонения при образовании и созревании сперматозоидов, апоптоз (естественный процесс гибели, в результате которого сперматозоид распадается на отдельные части), воздействие вредных внешних факторов. Именно такое явление, как апоптоз объясняет, почему в сперме всегда есть сперматозоиды с разрывами ДНК.

У здоровых фертильных мужчин доля сперматозоидов с нарушенной целостностью ДНК составляет примерно 15%. У бесплодных мужчин доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК может доходить до 30 %, а в отдельных случаях может подниматься и выше. На показателях спермограммы это обычно не сказывается, однако ряд исследований последних лет обосновывают наличие корреляции между концентрацией сперматозоидов в эякуляте и частотой разрывов ДНК сперматозоида.

Как фрагментация ДНК сперматозоидов влияет на фертильность?

  1. Снижается вероятность зачатия.
  2. Поврежденный сперматозоид может оплодотворить яйцеклетку, но в большинстве таких случаев уже на ранних стадиях эмбриогенеза могут начаться нарушения, и произойдет самопроизвольное прерывание беременности. Высоким уровнем фрагментированных сперматозоидов довольно часто обусловлено привычное невынашивание беременности.
  3. Проблемы могут возникнуть во время ЭКО или ИКСИ. Если будет использован сперматозоид с фрагментированной ДНК, то эмбрион может развиваться неправильно еще до его имплантации в полость матки, и попытки ВРТ с участием такого сперматозоида обречены на неудачу. Отмечено снижение и образования бластоцист, и частота наступления беременности.

Для определения степени фрагментации проводится специальный анализ — определение степени фрагментации ДНК сперматозоидов. Существует несколько методик этого анализа, обладающих практически одинаково высокой чувствительностью.

TUNEL метод. Это микроскопическое исследование спермы, цель его — обнаружить сперматозоиды с поврежденной ДНК и посчитать их количество.

SCSA — еще один метод анализа степени фрагментации ДНК сперматозоидов, основан на исследование структуры хроматина с помощью флуоресцентного ДНК-маркера. Окрашенные им сперматозоиды пропускают сквозь лазерный луч, который заставляет клетки светиться разными цветами, в зависимости от степени повреждения ДНК: зеленый – норма, желтый – умеренные дефекты, красный – критические изменения.

Читайте также:  Скелет верхних конечностей человека таблица

Правила подготовки:

  • Половое воздержание не менее 2 дней и не более недели. Оптимально – 3 суток до сбора эякулята.
  • В период подготовки не употребляйте алкоголь, не курите.
  • Избегайте перегревания (сауны, бани и т.д.) сроком в течение 72 часов.
  • Не принимайте лекарственные препараты, любые, в течение 24 часов, если врачом не указано обратное и нет угрозы жизни из-за прерывания терапии.
  • Исключите все физиопроцедуры и рентгенологическое обследование в течение 72 часов.
  • Не рекомендуется тестирование сразу же после перенесенного воспалительного заболевания с повышением температуры. Исследование лучше перенести.
  • Накануне исследования исключите физические и эмоциональные перегрузки.
  • Правильно питайтесь в период подготовки, питьевой режим -1,5-2 литра в день.

Исследование проводится при концентрации сперматозоидов не менее 1 млн/мл и объеме эякулята не менее 1 мл.

По результату теста выдается протокол, в котором указан индекс фрагментации ДНК. Индекс отражает процентное соотношение между «здоровыми» и «больными» сперматозоидами.

  • индекс фрагментации не превышает 15% от общей численности сперматозоидов — вероятность наступления беременности естественным путем достаточно высока
  • индекс фрагментации повышен и находится в пределах от 15% до 30% — шанс естественного оплодотворения возможен, но снижен
  • индекс фрагментации от 30% до 50% — возможно оплодотворение с помощью ИКСИ или ЭКО
  • индекс фрагментации ДНК сперматозоидов равен 50% и более -даже при использовании репродуктивных технологий наступление беременности маловероятно.

Задать вопрос

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов

Описание

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов — тест на выявление повреждений ДНК в сперматозоидах. Анализ помогает в оценке фертильной функции и выявлении причины бесплодия и спонтанных абортов.

Исследование выполняется только совместно с исследованием эякулята* (услуга 36.100 Спермограмма).

Показания:

  • бесплодие неясного генеза при нормальных показателях спермограммы;
  • неразвивающиеся беременности у супруги;
  • неудачные попытки использования вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО, ИКСИ, ИМСИ) в анамнезе;
  • поздний отцовский возраст.

Подготовка
Спермограмму сдают после полового воздержания. Рекомендуемый срок воздержания 2–7 дней. В период подготовки нельзя употреблять алкоголь в любых количествах.

За 7–10 дней необходимо исключить прием лекарственных препаратов, процедуры с перегреванием (УВЧ, сауна, баня).

В день, предшествующий выполнению анализа, желательно исключить тяжелые физические и психологические нагрузки.

После выполнения массажа простаты должно пройти не менее 3-х дней.

Если в период подготовки были простудные или другие острые заболевания, сопровождавшиеся подъемом температуры, стоит отказаться от выполнения исследования.

Условия взятия
Эякулят собирается путём мастурбации в стерильный пластиковый контейнер. Не допускается использование презерватива.

Для получения корректных результатов исследования необходимо собрать весь полученный материал.

Интерпретация результатов

Референсные значения: содержание сперматозоидов с разрывами ДНК — не более 15%.

Причины появления патологических изменений:

  • врождённые (генетически обусловленные) нарушения сперматогенеза (дефицит протаминов);
  • воздействие вредных факторов (различные виды излучения, приём некоторых лекарственных средств, систематический приём алкоголя, отравление свинцом, ртутью);
  • хронические воспалительные заболевания репродуктивных органов (простатит, везикулит);
  • варикоцеле.
Читайте также:  Месячные после пункции фолликулов без переноса задержка

Фрагментация ДНК сперматозоидов (TUNEL-тест)

Климов Юрий Викторович

Под фрагментацией ДНК сперматозоидов следует понимать нарушение целостности их цепочек. Чем сильнее повреждения, тем хуже качество генетического материала, следовательно, низкая вероятность наступления оплодотворения.

Если повреждения несущественны, яйцеклетка в состоянии устранить их самостоятельно. Это зависит от характера фрагментации, количества поврежденных участков, качества самой яйцеклетки (обычно ее определяет возраст и состояние репродуктивного здоровья женщины).

Причины

Причины нарушения ДНК бывают двух типов: внешние и внутренние. Внутренние это:

  • Сбой механизма отбраковки. У здоровых мужчин непригодные к оплодотворению сперматозоиды, вырабатываемые семенниками (тестикулами), устраняются. Но если функционирование механизма нарушено, они попадают в сперму, снижая ее качество и способность к зачатию.
  • Нарушение процесса вызревания. Созревают сперматозоиды в придатках яичек, в ходе вызревания происходит конденсация хроматина ядра клеток, отвечающая за активность сперматозоидов. Если процесс протекает с отклонениями, это становится причиной фрагментации их ДНК.
  • Прохождение лечения химио- и рентгенотерапией.
  • Повышенная температура тела.
  • Варикоз сосудов семенного канатика.
  • Высокотемпературные воздействия.
  • Наличие хронических заболеваний, воспалений, инфекций.
  • Оксидативный стресс при переходе через эпидидимий. Повреждения вызывают свободные радикалы, либо сперматозоиды выходят невызревшими.

Также нарушение цепочки ДНК вызывают токсины, прием антибиотиков, заболевания мочеполовой системы, вредные привычки.

Показания к анализу

Чтобы выявить разрыв ДНК-цепочки сперматозоидов, проводится специальный тест. Спермограмма в данном случае неинформативна. Она показывает только концентрацию сперматозоидов в эякуляте, их активность. Тест на фрагментацию показан:

  • при мужском бесплодии, если отсутствуют другие провоцирующие его факторы;
  • если попытки искусственного оплодотворения не дали результата;
  • повторяющиеся выкидыши;
  • если эмбрион плохого качества;
  • мужчинам в возрасте от 45 лет;
  • после криохранения образца спермы перед ЭКО (экстракорпоральным оплодотворением);
  • при варикозе сосудов семенного канатика;
  • если в течение трех месяцев имела место повышенная температура тела.

Также процедуру должны пройти мужчины, работающие в условиях повышенной вредности.

Как проводится анализ

Для проверки целостности ДНК спермы проводится tunel-тест, предполагающий микроскопическое исследование сперматозоидов. Образец спермы пациент должен собрать в специальный стерильный контейнер с крышкой. Важно! Презерватив не подходит для этой цели, так как компоненты, входящие в его состав, могут оказать негативное влияние на подвижность сперматозоидов. Также при транспортировке емкости с генетическим материалом необходимо соблюдать температурный режим, составляющий диапазон температур в пределах +27 до +37 градусов Цельсия.

Чтобы получить точный результат, анализ должен быть проведен в течение часа с момента забора образца. Для этого лаборант добавляет в эякулят реактив. Он, вступая в реакцию с семенной жидкостью, заполняет разрывы ДНК флуоресцирующим нуклеотидом, делая видимыми фрагментированные сперматозоиды. Лаборант проводит их подсчет, который указывается в процентах.

Для получения полной картины параллельно проводится электронно-микроскопическое исследование и спермограмма.

Подготовка к TUNEL-тесту

Чтобы тест был максимально точным, перед сдачей образца необходимо в течение 2-7 дней: воздержаться от половых контактов, приема лекарственных препаратов, посещения бань. Важно соблюдать режим питания, избегать употребления алкоголя, не курить. Перед забором спермы нужно освободить мочевик.

Читайте также:  Гематоген для диабетиков · GitHub

При повторных проведениях анализа рекомендуется соблюдать последовательность и длительность подготовительных мероприятий, так как это может повлиять на результат.

Расшифровка

После анализа выдается результат с индексом теста и снимок, на котором зафиксированы фрагментированные сперматозоиды. Индекс – это соотношение между поврежденным и здоровым, способным к оплодотворению, генетическим материалом. В норме показатель не должен быть выше 15%. Это говорит о том, что спермиев с разрушенной цепочкой ДНК меньше, чем здоровых, поэтому репродуктивное здоровье мужчины в порядке и существует высокая вероятность естественного зачатия.

При индексе выше 15%, но ниже 30% сохраняется возможность оплодотворения яйцеклетки естественным способом, но для этого может потребоваться много времени.

Если количество поврежденных сперматозоидов в эякуляте составляет 30-50%, специалисты считают, что наступление беременности естественным путем маловероятно, поэтому рекомендуют ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), внутриматочную инсеминацию (репродуктивная методика, предполагающая введение здоровых, полученных и отобранных заранее сперматозоидов в цервикальный канал) или ИКСИ. Так, при показателе индекса более 30%, врачи-репродуктологи рекомендуют проводить ЭКО. Если фрагментированный генетический материал составляет 50% и выше, экстракорпоральное оплодотворение малоэффективно. Целесообразно применять интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ). При индексе 60% и больше, шансы на успешное оплодотворение минимальны. Проводится ИКСИ, либо берется донорская сперма.

Лечение

Еще недавно отсутствовала возможность выявить поврежденные сперматозоиды, не говоря о том, чтобы это лечить. Сегодня эта проблема поддается лечению. Внедрение инновационных медицинских методик позволяет успешно восстанавливать фрагментированную ДНК сперматозоидов.

Для этого следует устранить или ограничить воздействие факторов, провоцирующих мужское бесплодие: лишний вес, вредные привычки (курение, алкоголь), воздействие токсических, химических веществ (работа на вредных производствах). Второй этап – комплексная диагностика, устранение различных воспалительных процессов в организме, в том числе заболеваний репродуктивной системы мужчины. Параллельно проводится лечение антибактериальными, противовоспалительными медпрепаратами (при необходимости). Обязательно назначаются витаминные комплексы, антиоксиданты, позволяющие восстановить мужское здоровье и способствующие формированию здоровых сперматозоидов.

Длительность лечения может составлять 3-6 месяцев. Иногда может понадобиться больше. Если терапия оказалась малоэффективной, и количество здоровых сперматозоидов не превышает 20-30%, врачи предлагают паре услугу ИКСИ. Так, из эякулята репродуктологи искусственным путем отбирают здоровый, способный к оплодотворению, генетический материал. Затем его подсаживают в яйцеклетку женщины.

В случае большого количества спермиев с фрагментированным ДНК, также проводиться операция по извлечению их непосредственно из яичек. Это обусловлено тем фактом, что во время эякуляции повышается процент поврежденных клеток.

Ответы на популярные вопросы

Влияет ли прием лекарств на анализ на фрагментацию ДНК?
На фрагментацию ДНК влияет прием некоторых лекарственных средств и химиопрепаратов.

Как улучшить фрагментацию ДНК?
Сначала необходимо разобраться в возможных причинах фрагментации и затем убрать ее причину, если это возможно.

Ссылка на основную публикацию
Что такое рак первые признаки, симптомы, диагностика и лечение
Что за болезнь: рак В любом случае рак пугает. Большая часть страхов рождается из-за неправильных представлений о заболевании или просто...
Что такое каудальная миграция грыжи Остеохондроз
Номенклатура и классификация патологий межпозвонковых дисков В соответствии с номенклатурой патологии межпозвонковых дисков версии 2.0 выделяют следующие термины: Нормальный диск...
Что такое киста челюсти (верхней, нижней) Симптомы, Лечение, Последствия
Что такое киста в челюсти: виды, причины и проявления, лечение Что такое киста челюсти? Это полая капсула с жидкостью, локализованная...
Что такое сахарный диабет типы, определение
Диабет Основные факты Диабет — это хроническая болезнь, развивающаяся в тех случаях, когда поджелудочная железа не вырабатывает достаточно инсулина или...
Adblock detector